简介
心脏病是全球主要死因之一,而要开发心脏病疗法挽救生命,关键在于更深入地探究心肌细胞在心脏再生和修复中可能发挥的作用。虽然手术干预(搭桥、插管、辅助装置)仍然是应用最广泛的疗法,但心血管疾病的性质不可避免地会导致心力衰竭,进而需要心脏移植。
由于心脏移植的需求远超过供应,因此人们正积极寻求基于细胞的心脏修复疗法,作为更实用且经济有效的低风险方案。然而,尽管对心肌细胞进行了长达数十年的研究,但该细胞类型仍然是较难分选的细胞类型之一。LeviCell™提供了真实可行、直击要害的解决方案。
方法
LeviCell™通过其创新的磁悬浮技术,利用心肌细胞的独特性质将其与成纤维细胞分离,并在处理干细胞时富集分化活心肌细胞。由于 LeviCell™无需任何染料或抗体,因而不会激活基因表达,且细胞群表征得以保留。
此外,LeviCell™平台的 20 分钟三步流程可有效分选富集细胞,无需重复的手动操作,即使起始数量较少也能富集出活心肌细胞,并可轻松从充满碎片的样品中分选目标细胞类型。
Step 1
上样
将样品吸移到LeviCell™芯片中
Step 2
自动无标记排序
精确的密度梯度可根据细胞的物理性质来驱动悬浮
Step 3
样品采集
选定的种群被收集到单独的收集孔中,以供进一步分析或使用
结果
将诱导多功能干细胞 (iPSCs) 分化为心肌细胞,并在重悬于悬浮液之前进行代谢饥饿处理。利用LeviCell™处理,可从未分化的 iPSC 和成纤维细胞中富集心肌细胞。在6孔板中培养分选富集的细胞3 – 5天以验证其表型与活力。LeviCell™悬浮分离时,如下图:

分化后的心肌细胞的密度和由此产生的悬浮高度均明显高于非心肌细胞群体,可于左下图中清楚地观察到。而在右下图中可以清楚地观察到富集的心肌细胞群体与未富集的心肌细胞群体。

结论
近年来,通过对心肌细胞的研究,人们对心血管疾病的发病机制有了更深入的了解,并为开创当前外科手术干预的替代治疗方案奠定了基础。尽管取得了一些进展,但心肌细胞仍然是最难以分离和富集的细胞类型之一。LeviCell™在这一领域能发挥不可或缺的作用。LeviCell™平台无标记技术已被反复证明,能够成功富集分化的心肌细胞而不激活细胞或影响细胞群表征。这为进一步开发心血管疾病的新疗法提供了巨大潜力。