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用于生成和获取脂肪细胞
用于优化选择条件
用于定量分析涉及脂肪生成的基因差异
分化后,前体脂肪细胞会积聚脂质囊泡,导致其密度降低,可被LeviCell™检测到,并可将细胞悬浮高度用于表示分化程度(如下图)。
未分化的前体细胞会悬浮在一个统一的高度,表明为同源细胞群体。这些细胞悬浮在 100 mM 悬浮液中,并能达到图 b 所示的最终悬浮高度。
分化 10 天的前体细胞展示出存在 2 个不同的细胞群体。上层细胞表示已分化的脂肪细胞,而下层细胞为未分化的脂肪细胞。上层下部的黑色团块为细胞集合,突出表明了LeviCell™能够处理大细胞簇。
LeviCell™分离细胞
使用不同浓度的悬浮液来确定使两种脂肪细胞群之间悬浮距离达到最大时的浓度。
使用 30 mM 悬浮液可使分化和未分化脂肪细胞的悬浮高度差达到最大(上图a)。值得注意的是,随着悬浮液浓度的增加,两个细胞群的整体悬浮高度增加,而已分化和未分化脂肪细胞之间的距离减少。
qPCR验证
利用LeviCell™从分化 11 天(下图a、下图b)和 7 天(下图c、下图d)的起始样本中分离两种细胞群。qRT-PCR用于定量分析参与脂肪生成有关基因相对管家基因 (β actin) 的表达倍数变化富集,包括:PPARg(下图a、下图c)和 RXRa(下图b、下图d)。
对于分化 11 天的起始样本,LeviCell™明显对已分化脂肪细胞进行了很好的分离富集(Top fraction)。
对于分化了7天的起始样本,LeviCell™也同样对已分化脂肪细胞进行了较好的分离富集(Top fraction)。表明在相对较早的分化时间点,LeviCell™即可有效分离和富集脂肪细胞等高度敏感细胞。