简介
每年有数百万人罹患甚至死于主要由细菌等病原体引起的疾病。耐药菌株和机会性菌株的出现使得此类疾病的发病率和流行率增加。这些因素导致研究人员在快速、简便、有效分离有潜在危险的新菌株方面面临着艰巨挑战。
细菌分离、鉴定和药敏试验,对于了解耐药性的演变方式并确定耐药性的最佳新疗法和方案来说至关重要。当前的细菌分离过程非常耗时,需要高技能技术人员和精密实验室设备,并且涉及精细复杂的样品制备程序,使目标细菌承受不必要的较大压力。一个看似很小的事故都可能会导致灾难性的分析失败,在时间、资源和资金方面的高昂代价。因此,人们非常需要一种可靠、快速、简便、经济有效且可重现的方法,用于从各种样本中分离细菌,缩短药敏试验时间,并帮助研究人员识别最罕见的耐药性遗传突变。
毫无疑问,LeviCell™系统能够满足这一需求。
方法
LeviCell™是一个创新的细菌分离平台,集合多个细菌分离相关应用,包括药敏试验。LeviCell™简单的三步法工作流程可从低洁净度、高复杂性或受污染的样品中温和地分离活细菌群,无需标记、染色、预处理、校准或纯化。
只需将样品直接移入一次性耗材中,将微流控芯片加载至LeviCell™平台,等待约30分钟,即可分析并收集目标细菌细胞。
Step 1
上样
将样品吸移到LeviCell™芯片中
Step 2
自动无标记排序
精确的密度梯度可根据细胞的物理性质来驱动悬浮
Step 3
样品采集
选定的种群被收集到单独的收集孔中,以供进一步分析或使用
结果
从哺乳动物细胞和污染物中富集细菌
LeviCell™系统非常适合分离传染性病原体。一次性耗材“无标记液相磁悬浮芯片”为完全无菌环境,且芯片和仪器之间无接触,进而降低了交叉污染和颗粒雾化的风险。LeviCell™系统具有高批间重现性,无需校准,提高了可靠性并简化了实验流程。
无标记液相磁悬浮芯片的大直径通道无需对样品进行预过滤(以防止堵塞)。只要样品可以移入耗材上样容孔中,LeviCell™就可以对其进行处理。LeviCell™系统的温和分离过程(<1 psi,而传统技术为70-100 psi)可最大程度地从死细胞、碎片、土壤和其他细胞类型样本中分离并富集活细菌细胞,而不会对细胞造成不必要的压力。

感染细胞与未感染细胞的分离
感染细胞的悬浮高度与未感染细胞的悬浮高度有显著不同。未感染细胞悬浮高度远低于感染细胞,便于收集和用于下游分析研究。

药敏试验
抗生素处理的样品也存在类似的明显特征。有活力或耐药性的细菌会作为紧密的群体悬浮,并且比非耐药性(死)细菌的高度要低。此明显的特征可无需平板接种,从而将药敏试验时间从数天缩短到数十分钟。可轻松收集目标细胞以用于下游分析,帮助识别耐药性基因或突变。


从复杂样品中富集细菌细胞
此外,可以直接从拭子或其他采集源(如土壤)中快速、轻松地富集细菌样本,如下图所示。

结论
由于大多数传染病起源于细菌,因此确定特定细菌病原体对多种抗菌药物的敏感性和耐药性是新疗法开发的重要组成部分。LeviCell™可实现快速和直接的反应测试,并对有反应与无反应细胞群分别进行高效收集以用于下游分析。